产品货号:
MT2803
中文名称:
LAMP扩增预混液冻干球(SYBR荧光染料法)
英文名称:
DNA/RNA SYBR LAMP Premix Bead
产品规格:
100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品为LAMP扩增预混液冻干球,内含恒温扩增所用的反应缓冲液、SYBR Green荧光染料、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA聚合酶等,使用时只需要加入引物、模板即可进行核酸恒温扩增。Bst 4.0 DNA/RNA聚合酶可对DNA或RNA模板进行恒温扩增,是进行LAMP及RT-LAMP扩增反应的绝佳试剂。使用本制品可直接在恒温荧光仪或定量PCR以上进行LAMP反应扩增。
组分 | 规格 |
LAMP扩增预混液冻干球(SYBR荧光染料法) | 100粒 |
说明书 | 1份 |
保存:-20℃,有效期2年。室温可稳定保存6个月。
- 关于矿物油的使用,在配制完LAMP反应体系后,可加入一滴矿物油覆盖于反应液上部,可以有效的减少气溶胶的污染。实验证明矿物油并不影响机器的荧光数值读取。
- 关于扩增曲线的异常:由于LAMP扩增速度较快,荧光信号读取可能存在矫正计算问题,这与荧光设备的软件算法有管。在有些荧光PCR仪上,在相对荧光模式下,表现出曲线飞峰、终点曲线下降的问题。此时调整到原始荧光值模式下观察结果,或致电相应设备供应商进行咨询。
- 按下表向0.2mL EP反应管中加入各成分配制荧光LAMP反应体系
成分 用量 LAMP扩增预混液冻干球 1粒 10×LAMP Primer Mix 2.5μL 模板DNA/RNA X μL ddH2O 至25μL - 10×LAMP Primer Mix浓度:FIP/BIP 16μM each、LoopF/B 4~8μM each、F3/B3 2μM each。
- 反应体系配好后,置于荧光定量PCR仪中于65℃进行反应15~30min。1min收集一次荧光信号。读取扩增曲线进行阴性和阳性判读。
- 根据荧光扩增曲线判读阳性和阴性。
使用冻干微球进行全扩增体系用品的制备方法:
将优化的扩增引物分装于0.2mL EP管底部,于70~80℃条件烘干1~2h。烘干后的0.2mL EP管已经含有干燥的扩增引物,再加入一粒冻干微球即可制备成全扩增体系干燥品,该干燥品无需冷链运输,可长期保存。
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